Çökeltme reaksiyonu ayarlama yöntemleri

İçindekiler:

Çökeltme reaksiyonu ayarlama yöntemleri
Çökeltme reaksiyonu ayarlama yöntemleri
Anonim

Bu makale yağış reaksiyonu olgusuna ayrılacaktır. Burada bu fenomenin formülasyonunun özelliklerini, difüzyon fenomenini, genel özelliklerini, insan yaşamındaki rolünü ve çok daha fazlasını ele alacağız.

Olaya giriş

çökelme reaksiyonu genel karakteristiği
çökelme reaksiyonu genel karakteristiği

Çökelme, çözünebilir antijenlerin antikorlarla etkileşime girdiği ve sonuç olarak çökelmenin gözlendiği - bir çökelti - serolojik tipte bir fenomendir.

Çökeltme reaksiyonunun genel özelliği, antijen ve antikorun koordineli etkisi. Bu tür etkileşimler, bilinen antikorlar ve antijenler eklenerek test maddesinde bilinmeyen antijenlerin varlığının belirlenmesini mümkün kılar. Tuzların olmadığı çökeltme işlemi daha kötü ilerleyecektir ve en iyi optimum değer 7,0-7,4 pH aralığındadır.

Reaksiyonun bileşenleri

çökeltme reaksiyonu bileşenleri
çökeltme reaksiyonu bileşenleri

Çökeltme reaksiyonunun bileşenleri arasında üç ana unsur vardır:

  1. Moleküler bir yapıya sahip bir antijen. İyi tip durumundadır, başka bir deyişle,çözünür. Ayrıca, böyle bir antijene, bir lizat veya doku özütü, vb. olan bir çökeltici denir. Bir çökelti, oluşturduğu parçacıkların boyutunda yatan bir aglutinojenden karakteristik bir farklılığa sahiptir. Aglütinojen, doğal bir hücre boyutuna sahiptir ve çökelticiler, molekülün boyutu ile orantılıdır. Antijen solüsyonunun özelliği şeffaflıktır.
  2. İnsan kan serumunda ve ayrıca incelenen antikorları içeren bağışıklık tanı serumunda bulunan bir antikor.
  3. Elektrolitler, izotonik olan sodyum klorür çözeltileridir.

Presipitojen üretimi

Materyallerin öğütülmesi ve onlardan protein antijenlerinin çıkarılmasıyla elde edilen bir presipitojen olmadan bir çökelme reaksiyonu kurmak imkansızdır. Ekstraksiyon kaynatma veya diğer yöntemlerle gerçekleşir.

Lisatların yanı sıra doku ve organ ekstraktları, kan serumu, mikrobiyal et suyu kültürlerine dayalı çeşitli filtrat türleri ve ayrıca mikroorganizmaların tuz ekstraktı ve otolizat maddeleri dikkat çekicidir. çökeltici örneği.

Yağışta kurulum

Şimdi çökelme reaksiyonunu kurma yöntemini düşünelim.

Özel hazırlanmış test tüplerinde gerçekleşen bir halka-çökelme reaksiyonu gerçekleştirilir. Serum, bulaşıkların boşluğuna verilir ve bir pipet ucu yardımıyla duvarın üzerinden dökülür. Daha sonra uygun miktarda çökeltici dikkatli bir şekilde üstüne serilir ve ardından tüp yatay konumdan dikey konuma getirilir. Çökeltme reaksiyonunun kurulması ve hesaba katılması çok titiz bir işlemdir. Sonuç, antijen ve antikor arasındaki sınırda beyaz bir halkanın görünmesinden sonra kaydedilir. Reaksiyonun reaksiyona giren elemanları birbirine karşılık geliyorsa, bağlanırlar, ancak bu, etkileşimlerinin uzun bir süresinden sonra fark edilir hale gelir. agar jelin aktarıldığı slayt, küçük bir tabaka halinde uygulanır. Jel içinde sertleştikten sonra, antijenlerin ve antikorların yerleştirileceği az sayıda kuyucuk açılır. Bu eylemi gerçekleştirmenin iki yolu vardır: radyal immünodifüzyon yöntemi ve çift immünodifüzyon yöntemi.

çökeltme reaksiyonu kullanılmaz
çökeltme reaksiyonu kullanılmaz

Genel bilgi

Çökeltme işleminin mekaniği, aglütinasyon cihazına benzer. Bağışıklık tipi serumun etkisi altında, reaksiyona girmiş olan antijen, dağılma derecesini az altır. Önemli bir koşul, hem serumun hem de antijenin şeffaflığıdır.

Antijenleri antikorların üzerine bindirirseniz reaksiyonun kaydını iyileştirebilirsiniz. Sonuç olarak, bir halka şeklinde çökeltilerin görünümü gözlemlenebilir. Bu fenomene halka çökeltme denir ve 2,5 ila 3,5 mm çapa sahip özel tüplerde gerçekleştirilir. Bir çökelme reaksiyonunun en yaygın örneklerinden biri şarbon teşhisidir.

Çökeltme, agardaki bir difteri kültürünün toksiklik düzeyini belirlemeyi mümkün kılar.

İncelenen reaksiyon sırasındaantijenik komplekslerin ve antikorların çökelmesi meydana gelir. Yağış, hasta veya aşılı bir kişinin ve hayvanların kan serumundaki antikor miktarını belirlemenizi sağlayan immünolojik bir olgudur.

Titrasyon Sonucu

bir çökelme reaksiyonu kurmak için yöntemler
bir çökelme reaksiyonu kurmak için yöntemler

Yukarıdaki yöntemin titrasyonuyla elde edilen verilerin ölçülebilir olmadığını bilmek önemlidir. İçerilen antikor sayısının nicel bir değerlendirmesini oluşturmak ve analiz etmek için, M. Heidelberger ve E. Kabat tarafından eşdeğerlik bölgesinin araştırılmasına ve tanımlanmasına dayanan özel bir reaksiyon tekniği geliştirilmiştir. Antijenlerin yaş sayısının sabit bir antiserum hacmiyle karıştırılması, başlangıçta oluşan çökeltide bir artışa yol açar ve daha sonra antijen komplekslerini çözme kabiliyetindeki bir artış nedeniyle tekrar azalır. Her tüpte bulunan süpernatanlardaki antikor miktarını belirleyerek, antikor içeren belirli sayıda tabakta sıvının eksik olacağını görebilirsiniz. Burada diğer test tüplerine kıyasla en büyük çökelti oluşacaktır. Bu ve antijenik protein çökeltisinin proteinlerin toplam değerinden çıkarılması nedeniyle, incelenen spesifik serum hacminde bulunan antikorların tam değerini elde etmek mümkündür. Ayrıca, çökeltinin protein moleküllerinin miktarı, nitrojen miktarı ile veya kolorimetrik yöntemler kullanılarak belirlenir.

Değerlerin değerlendirilmesi

çökeltme reaksiyonunun ayarlanması ve muhasebeleştirilmesi
çökeltme reaksiyonunun ayarlanması ve muhasebeleştirilmesi

Teşhis metodolojisinde çökelme değerlerinin tahmini, çökeltinin kendisinin olmayabileceği, çökelti özelliğine sahip olmayan bir antikorun bağışıklık serumunda bulunma olasılığını dikkate almalıdır. antijenlerle reaksiyona girdikten sonra oluşur. Bu tür moleküllerin listesi, eksik antikorları ve gama-A globulin grubundan bazı türleri içerir.

Laboratuvar koşullarındaki çökeltme reaksiyonu, uygulamasını çeşitli modifikasyon türlerinde bulur. Örneğin, termopresipitasyon reaksiyonu, termal denatürasyona uğramayan botulizm, şarbon vb. bakteriyel antijenlerini tespit etmek için kullanılır. Halka çökeltmesinden farklı olarak, bu tür tepkime, kaynamış halde söz konusu malzemenin süzüntülerini kullanır.

Karmaşık bir karışımdaki çökelme tepkimesinin analizi, karışımın tek tek elementlerinin özelliklerini karakterize etmeye izin vermez. Bu gibi durumlarda, kişi agarda çökeltme yöntemine başvurur ve ayrıca immünoelektroferez kullanır.

Düzenli yağış

çökelme reaksiyonları
çökelme reaksiyonları

Bu araştırma alanında, dağınık yağış reaksiyonu (RPD) kavramı vardır. Antikorların ve çözünür antijenlerin jelinde yayılma yeteneğine dayanır. Difüzyon, belirli bir maddenin bir molekülünün, termal hareketin neden olduğu bir diğerinin moleküllerine nüfuz etme yeteneğidir.

Jel, sıvı fazın katı fazda eşit olarak dağıldığı dağınık tip bir sistemdir. Çoğu zaman, agar jeli böyle bir reaksiyon için kullanılır.

Parametreleri verdikten sonra,moleküllerin birbirine göre difüze olabileceği koşullar altında, karşılaşmalarına bir antijen + antikor kompleksinin oluşumu eşlik edecektir. Böyle bir neoplazm, jelin kendisinde olarak yayılabilir ve çıplak gözle tespit edilebilen bir şerit şeklini alarak çöker. Antijen ve antikor homolog ise, hiçbir bant oluşmayacaktır.

Agar tabakasındayken difüzyonun gerçekleşeceği koşulların yaratılması bileşenlerin dökülmesini içerir, ancak toplam kuyu sayısı ve bunların göreceli konumu şu şekilde belirlenir: gereken görevin türüne karar verin. RPD kişiye, bilinen antikor serumlarını kullanarak test ederek bilinmeyen izole edilmiş virüsleri algılama ve tanımlama yeteneği verir.

Uygulama

diffüz çökelme reaksiyonu
diffüz çökelme reaksiyonu

Yağış sadece hastalıkların teşhisinde yaygın olarak kullanılmaz, aynı zamanda adli tıp muayenesinde de uygulama bulur. Bir suç silahında bulunan ve çökelme reaksiyonunu kullanmayan bir organ veya doku parçasının, kanın türünü belirlemenin mümkün olduğu bir analiz hayal etmek zor. Bu işlem sırasında çeşitli hayvanlara ve kuşlara bağışıklık kazandırılarak elde edilen çökeltici serumlar kullanılır. Serum titre seviyesinin 1:10000'den az olmaması ve ayrıca yeterli özgüllüğe sahip olması önemlidir. Tespit edilen kan noktasından veya kabuğundan, fiziksel olarak bir özüt yapılır. daha fazla maruz kalacak olan çözümçökeltici serum Bu reaksiyona göre hem insanların hem de hayvanların doku ve organ proteinlerinin tiplerini belirlemek mümkündür. Bulutlu özler elde etmek, kişiyi agar üzerinde yağışa başvurmaya zorlar.

Sonuçlar

Okunan bilgileri analiz ederek, antikorlar kullanarak çeşitli antijenlerin teşhisine izin verdikleri için çökelme reaksiyonlarının bir kişi için son derece önemli olduğu sonucuna varabiliriz, bu fenomen aynı zamanda adli tıbbi muayenede yaygın olarak kullanılır ve türünü tanımlamanıza izin verir. belirli bir konu ile ilgili olarak kan, doku veya organ. Çözülmekte olan problemin ortaya çıkan ihtiyaçlarına göre kullanılan çeşitli yağış türleri ve yöntemleri vardır.

Önerilen: