Modern tıp, patojenin tanımına, bağışıklık tepkisini uyaran genetik olarak yabancı maddelere, nükleik asitlere, ayrıca alerjik ve bağışıklık değişikliklerine dayanarak insanlarda hastalıkların etiyolojisini belirlemeyi mümkün kılan spesifik tanı yöntemlerine sahiptir. eylemleri nedeniyle ortaya çıkar. Bugün, RIA immünoloji ve virolojide yaygın olarak kullanılmaktadır, yani radyoimmünoassay, belirleme hedefleri, bileşenler, bu makalede ele alacağımız muhasebe kursu. Bu test, antikorlarla etkileşimlerinin bir sonucu olarak antijenleri saptayabilir.
Tanım
RIA, özel bağlama sistemlerine sahip radyonüklid etiketli analog maddeler kullanıldığında antijenlerin antikorlarla reaksiyona girmesine dayanan, sıvılardaki biyolojik olarak aktif maddelerin teşhisine yönelik bir yöntemdir. etkileşimlerinden sonraayrılan ve radyoaktivitesi incelenen bir bağışıklık kompleksi oluşur. Radyoimmunoassay'in standart reaktif kitleri kullanılarak gerçekleştirildiği bilinmektedir.
Her reaktif belirli bir maddenin konsantrasyonunu belirleyebilir. Bir kişiden alınan biyolojik sıvı bir reaktif ile karıştırılır, inkübasyon süresinden sonra serbest ve bağlı radyoaktif maddeler ayrılır, ardından radyometri yapılır ve sonuçlar hesaplanır. Maddeleri etiketlemek için bir iyot izotopu kullanılır. Belirli bir miktarda işaretlenir ve eklenir.
Uygulama
Radyoimmün analizi tıpta ve mikrobiyolojide geniş bir uygulama alanına sahiptir. Kalp ve damar hastalıklarını, endokrin hastalıklarını ve diğer vücut sistemlerini teşhis etmek için kullanılır. RIA'lar ayrıca, fetal gelişimin patolojisi olan kısırlığın nedenini belirlemek için sıklıkla kullanılır. Onkolojide bu analiz, tedavinin etkinliğini izleyebilmek için neoplazmaların belirteçlerini belirlemek için yapılır. İmmünolojide RIA, kandaki immünoglobulinlerin, enzimlerin, proteinlerin vb. varlığını incelemek için kullanılır. Bugün, bu analiz, bir gramın milyonda birine kadar çeşitli hormonların konsantrasyonunu tespit etmenizi sağlar. Bu nedenle radyoimmün kan analizi kardiyoloji, onkoloji, endokrinoloji, jinekoloji ve virolojide yaygın olarak kullanılmaktadır.
RIA Yöntemleri
Doğaya bağlı olarak çeşitli analiz yöntemleri arasında ayrım yapmak gelenekseldir.reaksiyonlar:
- Rekabetçi olmayan yöntem, standart ve saptanabilir antijenler, tampon çözeltisi, izotop etiketli antikorlar, sorbene bağlanan belirli antikorlar gibi reaksiyon bileşenleri ile karakterize edilir. Test edilecek antikorlara bir antijen eklenir. İnkübasyondan sonra antijen-antikor kompleksleri ortaya çıkar, sorbent yıkanır, kompleks içindeki antijene bağlanan etiketli antikorlar eklenir. Radyoaktivite, test edilen antijenin konsantrasyonuna bağlıdır.
- Rekabetçi radyoimmünoassay, antijen rekabeti tarafından yönlendirilir. Burada, kontrol ve belirlenmiş antijenler, bir tampon çözeltisi, sorbene bağlanan belirli antikorlar ve ayrıca izotop etiketli bir antijen gibi reaksiyonun bileşenleri vardır. Teşhis, incelenen antijenin tanıtılmasıyla başlar. Sorbent üzerinde bir antijen-antikor kompleksi oluşur. Daha sonra sorbent yıkanır ve etiketli antijen enjekte edilir. Bunu yaparken, antikora bağlanır. Sayaçlar yardımıyla reaksiyon ve radyoaktivite miktarı ölçülür. Örnekteki antijen miktarı ile ters orantılı olacaktır.
- Dolaylı yöntem en yaygın olanıdır. Bu durumda, reaksiyon bileşeninin radyoimmünoassay'inde kontrol ve test serumu, sorbent üzerine bağlanan antijenler veya antikorlar, izotoplarla etiketlenmiş antikorlar, tampon çözeltiler bulunur. Tanı konan antikorlar veya antijenler, sorbene bağlı antijenler veya antikorlarla reaksiyona girer. Daha sonra inkübasyon çıkarılır, etiketli antikorlar enjekte edilir ve bu antikorlarantijen-antikor kompleksleri.
Analiz Metodolojisi
Yani, radyoimmunoassay özel reaktifler kullanılarak gerçekleştirilir. Setler standarttır, bu nedenle herhangi bir hata veya ihlale izin verilmez. Teşhis sonuçları güvenilirdir. Analiz sabah yapılır, bunun için bir kişiden venöz kan alırlar. Laboratuvarda serum, RIA için kullanılacak olan kandan ayrılır. Bu serum reaktiflerle karıştırılır. Elde edilen karışım, bir termostatta belirli bir sıcaklıkta inkübe edilir.
Serbest ve bağlı izotoplar, elde edilen karışımda ayrılır. Bundan sonra, alınan malzeme incelenir ve sonuçlar hesaplanır. Radyoimmünoassay mekanizmasının birkaç seçeneği vardır. Yukarıda açıklanan teknik, tüm bileşenler sıvı halde olduğundan sıvı fazlı bir RIA'dır. Antikorların sıvıda çözünmeyen bir taşıyıcıya yerleştirildiği RIA ve katı faz vardır.
Tanılamanın kullanılabilirliği
Bu tanı yönteminin tıpta kullanımı her geçen yıl daha popüler hale geliyor. Son zamanlarda, radyoimmünoassay, bir doktor tarafından kesin tanı koyarken reçete edilebilecek standart bir tanı yöntemi haline geldi. Uzun zamandır sadece laboratuvarlarda yapılan bu tür analizler, günümüzde yaygın bir araştırma yöntemi haline geldi. Ancak RIA, pahalı ekipmanların (gama sayaçları) kullanılmasını gerektirir ve reaktif kitlerinin hizmet ömrü kısadır. Bütün bunlar, böyle bir analizin ana dezavantajıdır, bu da onun durumunu belirler.pahalı maliyet.
Ayrıca, RIA son zamanlarda izotoplarla etkileşim gerektirmeyen daha modern araştırma yöntemlerinin yerini almaya başladı. Bunlara enzim immünoassay dahildir. Bu nedenle, DEA birçok klinikte arzu edilir. Büyük şehirlerde ve teşhis merkezlerinde uzun süredir kullanılmaktadır, ancak küçük kasabalardaki sıradan hastanelerde bu analiz, yüksek maliyeti nedeniyle pratik olarak kullanılmamaktadır.
RIA'nın Onuru
Radyoimmunoassay'in birçok avantajı vardır. Oldukça spesifiktir ve yüksek hassasiyete sahiptir, bu da biyolojik olarak aktif maddelerin varlığını inanılmaz derecede küçük miktarlarda belirlemeyi mümkün kılar. Bu analiz çok basit bir şekilde yapılır, bir kişinin sadece venöz kan bağışlaması gerekir. Test sonuçları %100 doğrudur ve ertesi gün hazırdır. RIA ayrıca kolayca otomatikleştirilebilir. Böylece, bu analiz, vücutta enfeksiyon varlığını gösteren bulaşıcı bakterilerin atık ürünleri olan proteinleri tanımlamanıza olanak tanır.
Virolojide Teşhis
En umut verici RIA, viral patojenleri hızlı bir şekilde tanımlamanıza izin verdiği için viroloji içindir. Bunun nedeni, son yıllarda yüksek hızda yayılan ve insanlar arasında ölümlere neden olan çeşitli enfeksiyonların görülme sıklığının artmasıdır. Bu, özellikle yüksek olmayan ülkeler için geçerlidir.sosyal ve ekonomik kalkınma (Uzak Doğu ülkeleri), radyoimmünoassay burada sadece vazgeçilmezdir. Mikrobiyoloji, patojenik bakterilerin neden olduğu bulaşıcı hastalıkları tespit etmek için de bu tanı yöntemini kullanır. Örneğin, DEA, tifo ateşini tespit etmek için yaygın olarak kullanılmaktadır. Hastalığın ilk günlerinde, tedavinin atanmasından önce dışkı ve kusma çalışması yapmak gerekir. Ancak teşhis sonuçları uzun bir süre sonra elde edilecektir. Burada RIA kurtarmaya geliyor, analiz, hastalığın nedensel ajanını kısa sürede tanımlamanıza izin veriyor. Bir kişi kan bağışında bulunur, ertesi gün çalışmanın sonuçları hazırdır. Bu analiz, doğru bir teşhis koymaya yardımcı olur.
Sonuçlar
Radyoimmunoassay şu anda en hassas tanı yöntemlerinden biridir. Antikorların elde edilebileceği herhangi bir maddeyi analiz etmek için kullanılır. Bu yöntem, incelenen sıvının en küçük hacminde birçok numunenin yapılmasını ve tam otomatikleştirilebildiği için sonuçların mümkün olan en kısa sürede kaydedilmesini mümkün kılar. Bu analiz 1950'lerde Solomon Burson tarafından geliştirilmiştir. Otuz yıl sonra yaygınlaştı. Bugüne kadar, analiz yüksek bir duyarlılığa sahip olduğundan DEA'ya yüzde yüz alternatif yoktur. RIA, tıbbın çeşitli dallarında olduğu kadar mikrobiyoloji ve virolojide de kullanılmaktadır.
Sonunda
Yöntemin virolojide kullanımı bugün çok alakalı çünküenfeksiyonların yayılmasını araştırma, doğru teşhis koyma ve spesifik tedaviyi reçete etme yeteneği. Bu sorun özellikle ekonomik ve sosyal gelişme düzeyi düşük olan ülkeler için geçerlidir. Ayrıca bu analiz, insan vücudundaki hormon ve enzim miktarını tespit etmenizi sağlar. Güvenilir sonuçlar elde etmek için araştırmacının sadece analiz için kan bağışlaması gerekir. Tıp, radyoimmunoassay ile birlikte durmuyor, yeni araştırma yöntemleri ortaya çıkıyor, ancak RIA tıbbi teşhiste liderlerden biri olmaya devam ediyor.
