Bakteri araştırmaları, çok sayıda ekipman ve aletle titiz bir çalışma gerektirir. Mikroorganizmaların laboratuvar koşullarında mümkün olan en hızlı şekilde çoğalmaları ve normal yaşamsal aktivitelerini sürdürebilmeleri için özel besin ortamları kullanılmaktadır. Bileşimleri ve biyofiziksel koşulları, bir bakteri kültürünün aktif büyümesi için uygundur.
Besin ortamı. Mikrobiyoloji ve diğer uygulamalar
Bakteri kolonileri, jöle benzeri veya yarı sıvı içerikle dolu Petri kaplarında laboratuvarda büyütülür. Bunlar, yüksek kaliteli mahsul büyümesi için bileşimi ve özellikleri doğal olanlara mümkün olduğunca yakın olan besin ortamlarıdır.
Bu tür ortamlar mikrobiyolojik araştırmalarda ve tıbbi teşhis laboratuvarlarında kullanılır. İkincisi, en sık sistematik konumu doğrudan kurumda belirlenen patojenik veya fırsatçı bakteri yaymalarıyla çalışır.
Doğal ve sentetikÇarşamba
Bakterilerle çalışmanın temel kuralı besin ortamının doğru seçilmesidir. Mikro ve makro elementlerin içeriği, enzimler, sabit bir asitlik değeri, ozmotik basınç ve hatta havadaki oksijen yüzdesi gibi çok sayıda kriteri karşılamalıdır.
Besleyici medya iki büyük gruba ayrılır:
- Doğal ortamlar. Bu tür karışımlar doğal içeriklerden hazırlanır. Bu nehir suyu, bitki parçaları, gübre, sebzeler, bitki ve hayvan dokuları, maya vb. olabilir. Bu tür ortamlar, çeşitliliği bakteri kültürünün büyümesini destekleyen yüksek doğal kimyasal içeriği ile karakterize edilir. Bu bariz avantajlara rağmen, doğal ortamlar belirli bakteri türleri ile özel araştırmalara izin vermez.
- Sentetik medya. Kimyasal bileşimlerinin tüm bileşenlerin tam oranlarında bilinmesi bakımından farklılık gösterirler. Bu tür ortamlar, metabolizması araştırmacı tarafından önceden bilinen belirli bir bakteri kültürü için hazırlanır. Aslında bu nedenle mikroorganizmaların gelişmesi için böyle bir sentetik ortam hazırlamak mümkündür. Bakterilerin hayati aktivitesini analiz etmek için kullanılırlar. Örneğin çevreye hangi maddeleri ve ne kadar saldıklarını öğrenebilirsiniz. Mikroorganizmalar da doğal ortamda büyüyecek, ancak maddelerin başlangıç oranlarının bilinmemesi nedeniyle bileşimdeki herhangi bir nicel değişikliği izlemek mümkün değil.
Diferansiyel-tanı ortamları
Bakterilerle çalışırken sadece sıradan besleyici ortamlar kullanılamaz. Mikrobiyoloji geniş bir bilimdir ve bu nedenle, bir çalışma yürütürken, bazen bir nedenden dolayı bir mikroorganizma seçimi yapmak gerekir. Laboratuvarda ayırıcı tanı ortamının kullanılması, hayati aktivitelerinin biyokimyasal işaretine göre bir Petri kabı üzerinde istenen bakteri kolonilerini seçmeyi mümkün kılar.
Bu tür ortamların bileşimi her zaman aşağıdaki bileşenleri içerir:
1. Hücre büyümesi için besinler.
2. Analiz edilen substrat (madde).
3. Belirli bir reaksiyon oluştuğunda karakteristik bir renk verecek bir gösterge.
Bir örnek, ayırıcı tanı besin ortamı "Endo"dur. Laktozu parçalayabilen bakteri kolonilerini seçmek için kullanılır. Başlangıçta, bu ortam pembemsi bir renge sahiptir. Bir mikroorganizma kolonisi laktozu parçalayamazsa, normal beyaz rengi alır. Bakteriler bu substratı parçalayabilirlerse, karakteristik parlak kırmızı bir renge dönüşürler.
Seçmeli Çarşambalar
Teşhis laboratuvarları genellikle birçok farklı bakteri türü içeren sürüntülerle çalışır. Açıkçası kaliteli iş için ihtiyacımız olan kolonileri bir şekilde dışardan onlarca kişiden seçmek gerekiyor. Bu, yalnızca bir tür mikroorganizmayı desteklemek için ideal olarak formüle edilmiş bir bakteri üreme ortamının yardımcı olabileceği yerdir.
Örneğin,böyle bir seçmeli ortam sadece Escherichia coli üremesi için uygundur. Ardından, bir Petri kabına birçok bakteri ektiğimizde, yalnızca aynı Escherichia coli'nin kolonilerini göreceğiz ve daha fazlasını görmeyeceğiz. Çalışmaya başlamadan önce, diğer türlerin bir karışımından başarılı bir şekilde seçilebilmesi için çalışılan bakterinin metabolizmasını iyi bilmek gerekir.
Katı, yarı katı ve sıvı kültür ortamı
Bakteriler yalnızca katı yüzeylerde büyütülemez. Besin ortamları, üretim sırasında bileşime bağlı olarak kümelenme durumlarında birbirinden farklıdır. Başlangıçta hepsinin sıvı bir kıvamı vardır ve belirli bir oranda jelatin veya agar eklendiğinde karışım katılaşır.
Sıvı kültür ortamları genellikle test tüplerinde bulunur. Bu koşullar altında bakteri üremesi gerekirse, kültür örneği ile bir çözelti ekleyin ve 2-3 gün bekleyin. Sonuç değişebilir: bir çökelti oluşur, bir film belirir, küçük pullar yüzer veya bulanık bir çözelti oluşur.
Yoğun kültür ortamı genellikle mikrobiyolojik araştırmalarda bakteri kolonilerinin özelliklerini incelemek için kullanılır. Bu tür ortamlar her zaman şeffaf veya yarı saydamdır, böylece mikroorganizma kültürünün rengini ve şeklini doğru bir şekilde belirlemek mümkündür.
Medya hazırlığı
Et suyu, jelatin veya agar bazlı et-pepton karışımları gibi substratların hazırlanması çok kolaydır. Bir sıvıya katı veya yarı sıvı bir alt tabaka yapmanız gerekiyorsasırasıyla %2-3 veya %0,2-0,3 jelatin veya agar ekleyin. Karışımın sertleşmesinde büyük rol oynarlar, ancak bir besin kaynağı değildirler. Böylece bakteri kültürünün büyümesi için uygun besin ortamları elde edilir.
